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  • 产品名称:
  • 转基因 Cry2A 试剂盒
  • 产品型号:
  • Cry2A
  • 产品简介:
  • 转基因 Cry2A 试剂盒系用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗,双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。
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产品名称:转基因 Cry2A 试剂盒


 

【原理】
本品系用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗,双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。


【试剂盒组份(规格)】
预包被板(抗 Cry2A 单抗)      12 孔×8
Cry2A 酶标抗体                 12 ml×1 瓶
20×浓缩洗涤液                      30 ml×1 瓶
5×抽提液/稀释缓冲液                30 ml×1 瓶
底物液 A                            7 ml×1 瓶
底物液 B                            7 ml×1 瓶
终止液                              7 ml×1 瓶
使用说明书                          1 份
0ppb 阴性对照                       1ml
3 个不同浓度的标样:
1 ppb, 5 ppb,10 ppb            各 1ml


【试剂准备】
试剂盒中的 20×浓缩洗涤液 30 ml 加 570 ml 灭菌 ddH2O 溶解稀释至 1×洗涤液,
5×抽提液(30 ml)加 120 ml ddH2O 稀释至 1×抽提液,4 ℃存放备用。


【样品准备】
称取约 20 mg 叶片,加 0.5 ml 1×抽提液(使用前 30 min 放置室温)研磨至匀浆,室温放置 30 min,测定前把样品上清液稀释 5-20 倍。
测定茎干和胚乳中的 Bt 蛋白时,样品称取约 40 mg,加 1ml 1×抽提液研磨。


【ELISA 反应】
1. 依次加 100 μl 阴性对照,标准品(3 个不同浓度的标样: 1 ppb, 5 ppb,10ppb)和待测样品至 96 孔板;
2. 用封口膜盖住 96 孔板,快速摇动平板混匀样品;
3. 37 ℃恒温箱孵育 30 min;
4. 倒掉 96 孔板中液体,用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板,漂洗 5 次,用吸水纸拍干;
5. 按顺序在每个小孔中加入 100 μl Cry2A-酶标抗体,然后重复步骤 2;
6. 37 ℃恒温箱孵育 30 min;
7. 倒掉 96 孔板中液体,用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板,漂洗 5 次,用吸水纸拍干;
8. 依次加入 50 μl 底物 A 液,50 μl 底物 B 液,重复步骤 2;
9. 37℃恒温箱孵育 10 min,加 50μl 终止液,充分混匀终止反应,15 min 以内在酶标仪上读取结果。在 450 nm 为主波长,630 nm 为次波长(或单波长 450 nm)下,用空白孔校零,再读取各孔 OD 值。


【注意事项】
1. 测定中需使用的所有试剂和 96 孔板提前 30 min 放置室温温育(否则会影响试验准确性),注意 12 连管必须温育后再从平板上取下,未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存;
2. 试剂使用前应充分摇匀;
3. 摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染;
4. 使用洗涤液漂洗时,洗涤液需要填满每个小孔,进行充分漂洗;
5. 研磨好的样品如果不能一次全部测量,可以暂时在 4 ℃避光保存,但是最好在 24 h 内测定;
6. 结果判读请在反应终止后 15 min 内完成。


【Bt 蛋白浓度计算公式】

【储存条件及有效期】
试剂盒储存于 2-8℃,切勿冻存;未开封试剂盒有效期 12 个月,开封后 3 个月内用完。(见包装盒上标签有效期)

 

【技术参数】
本品适用于玉米、棉花、大豆以及其各种农作物中转基因成分的快速定性测试。

 

【产品编号】
规格:96孔
检测样本:千亿国际官网/叶片
检测时间:约2小时
有效期:12个月
储存条件:2℃~8℃避光保存,切勿冷冻

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